Browsing by Author "Fuentes, Christian"

Now showing 1 - 3 of 3
  • Thumbnail Image
    Item
    ATP-Dependent Biomechanical Properties of Ciliated and Non-Ciliated Cells Measured by Atomic Force Microscopy
    (CELL PRESS, 2016) Droguett, Karla; Navarrete, Camilo; Fuentes, Christian; Rios, Mariana; Villalon, Manuel; Barrera, Nelson
  • No Thumbnail Available
    Item
    Polydisperse molecular architecture of connexin 26/30 heteromeric hemichannels revealed by atomic force microscopy imaging
    (2020) Naulin, Pamela A.; Lozano, Benjamin; Fuentes, Christian; Liu, Yu; Schmidt, Carla; Contreras, Jorge E.; Barrera, Nelson P.
    Connexin (Cx) protein forms hemichannels and gap junctional channels, which play diverse and profound roles in human physiology and diseases. Gap junctions are arrays of intercellular channels formed by the docking of two hemichannels from adjacent cells. Each hexameric hemichannel contains the same or different Cx isoform. Although homomeric Cxs forms have been largely described functionally and structurally, the stoichiometry and arrangement of heteromeric Cx channels remain unknown. The latter, however, are widely expressed in human tissues and variation might have important implications on channel function. Investigating properties of heteromeric Cx channels is challenging considering the high number of potential subunit arrangements and stoichiometries, even when only combining two Cx isoforms. To tackle this problem, we engineered an HA tag onto Cx26 or Cx30 subunits and imaged hemichannels that were liganded by Fab-epitope antibody fragments via atomic force microscopy. For Cx26-HA/Cx30 or Cx30-HA/Cx26 heteromeric channels, the Fab-HA binding distribution was binomial with a maximum of three Fab-HA bound. Furthermore, imaged Cx26/Cx30-HA triple liganded by Fab-HA showed multiple arrangements that can be derived from the law of total probabilities. Atomic force microscopy imaging of ringlike structures of Cx26/Cx30-HA hemichannels confirmed these findings and also detected a polydisperse distribution of stoichiometries. Our results indicate a dominant subunit stoichiometry of 3Cx26:3Cx30 with the most abundant subunit arrangement of Cx26-Cx26-Cx30-Cx26-Cx30-Cx30. To our knowledge, this is the first time that the molecular architecture of heteromeric Cx channels has been revealed, thus providing the basis to explore the functional effect of these channels in biology.
  • No Thumbnail Available
    Item
    STRIDE - una aplicación Android para recolectar experiencias de peatones para apoyar a las intervenciones con un foco en la caminabilidad
    (2022) Steiniger, Stefan; Fuentes, Christian; Flores, Daniel; Castillo Mendoza, Bryan Williams; Vecchio, Giovanni; Walker, Jim; Carrasco, Juan Antonio; CEDEUS (Chile)
    La caminabilidad de calles o barrios puede ser evaluada de dos formas: por medio de modelos, usando bases de datos geográficas sobre el uso de suelo, tal como lo hace Walkscore.com, o a través de encuestas focalizadas en peatones. Ambas evaluaciones de caminabilidad ayudan a planificar barrios con mejor accesibilidad, diseñar intervenciones urbanistas y también podría entregar perspectivas del comportamiento peatonal a los investigadores y planificadores. Para facilitar los últimos dos propósitos, se desarrolla una aplicación móvil, llamada STRIDE.App, que permite a los peatones compartir sus experiencias de caminata. El enfoque del desarrollo de la aplicación ha sido una interfaz sencilla de utilizar, que logra compartir con bastante rapidez la percepción del transeúnte, al calificar la ubicación actual en tres posibles alternativas para caminar: 1. buena, 2. con algunos problemas o 3. mala - por medio de los colores verde, amarillo y rojo respectivamente. La información sobre los peatones, tales como edad, género y su capacidad física, es considerada clave para conocer “quien” ha tenido una experiencia positiva, regular o negativa. La app móvil fue usada en 4 casos de estudios en 2 continentes, comprobando su utilidad, pero también destacando los desafíos con respecto a la representatividad de los datos, y límites en el entendimiento de los contextos locales.